利血平致家兔“脾虚”模型和四君子汤的作用

庄剑青、曾兆麟

（2000－11－1）

利血平所致脾虚的动物模型接近临床脾虚患者的情况。动物模型不仅在消化道方面出现明显的机能障碍，如泄泻、食欲减退、胃肠蠕动亢进等，而且同时伴有其它植物神经功能紊乱的表现，如体温下降、畏寒乏力、眯眼等，与中医临床所见的脾虚现象相似。用健脾益气方剂四君子汤能改善这此症状，以方测证同样可验证该模型为脾虚模型。此模型的重现性好，简单易行。

一、原理

利用利血平对植物神经的影响及对消化道的副作用，制作家兔“脾虚”动物模型。检测其小肠收缩力和小肠电等以定量观察模型动物的小肠运动功能和胆碱能植物神经的功能改变。以健脾代表方剂四君子汤对模型动物进行实验性治疗，并观察上述功能变化，可说明四君子汤的有关药理作用。

二、实验准备

1．器材

兔台

二道生理记录仪

SMUP-PC型生物信号处理系统

机械电换能器

吸引电极（50ml注射器、负压表、输液用滴管、金属截止三通、乳胶管、细硅胶管、粗注射针头、细铜丝漆包线、直径0.3mm铂金丝）

恒温电热水浴

万能支架

手术剪、止血钳

1ml注射器

镊子

烧杯

温度计

台氏液

氧气袋（或瓶）

2．试剂

四君子汤水煎液1g/ml（人参0.25g、白术0.25g、茯苓0.25g、炙甘草0.25g）

利血平注射液

硫酸阿托品注射液

注射用异戊巴比妥钠

3．材料

动物: 家兔

三、实验步骤

1．脾虚家兔模型的制作：家兔体重2.5±0.5kg，每只动物每天肌肉注射利血平0.3mg/kg/次，连续三天，自由饮食及水，以出现腹泻或软便、体重下降、食少、蜷伏、自由活动减少、被毛蓬松、呈衰竭状态为造模成功。

2．记录小肠电：生理记录仪与吸引电极等的连结。吸引电极固定在万能支架上，电极端自由悬垂。家兔在末次注射到开始实验均禁食18-24小时，自由饮水。（1）离体小肠电记录：实验时将家兔击昏，立即剖腹，于距幽门约20cm处截取一段空肠约3cm，用台氏液冲洗出肠内容物，置于37℃台氏液中，通氧，吸引电极吸附于浆膜表面，吸附负压为20-26.66kPa （150-200mmHg），无关电极置于水浴中；生理记录仪滤波为10Hz，时间常数为0.2秒，稳定10分钟后，记录小肠电10分钟，随后向台氏液中滴加阿托品0.2mg/100ml，再记录小肠电5分钟。（2）在体小肠电记录：实验时家兔肌肉注射10％异戊巴比妥钠1ml/kg，麻醉后仰卧固定于实验兔台，腹部正中切开，暴露空肠，37℃台氏液滴于肠表面，吸引电极吸附于距幽门15～20cm的空肠浆膜面上；吸附负压、生理记录仪参数同上，无关电极联接于左下肢皮下，石英风暖炉保温，使家兔体温维持在37-38℃（肛温），记录小肠电30分钟。（1）、（2）分别测量下列指标：①慢波频率（次／分别）；②快波出现率（载有快波的慢波数／慢波总数×100％）；③最大振幅（毫伏）；④每丛快波数（次／丛）。

3. 记录肠肌收缩力：实验时将家兔击昏，立即剖腹，于距幽门约15cm处截取空肠上段2cm二段。37℃台氏液冲洗出肠内容物，然后分别纵向和横向悬吊于38℃台氏液中，并通氧，稳定10分钟后，用机械电换能器记录肠肌张力变化曲线。机械电换能器固定于万能支架，导线联接SMUP-PC系统，滤波为10Hz，记录小肠自发收缩的张力变化曲线，记录10分钟。

4. 四君子汤的实验性治疗：先以四君子汤水煎剂4ml/kg灌胃家兔，每天早晚各一次；二天后再同时肌肉注射利血平0.3mg/kg，每天一次，连续三天，自由摄食及饮水。

四、实验结果

利血平所致“脾虚”家兔在注射利血平20h后全部开始出现软便。同时伴有食量减少，多次注射后动物表现为消瘦、蜷伏、自由活动减少、被毛蓬松咪眼、体重减轻、食量减少等衰竭症状。其小肠的肌电快波活动（快波出现率、最大振幅、每丛快波数）和小肠肌收缩力（纵肌收缩力振幅、环肌收缩力振幅）都明显增加；四君子汤可以明显的抑制“脾虚”动物的小肠电和肠肌收缩力的异常改变，改善动物的一般状态。

五、注意事项

1. 实验中不可随意增加、延长模型动物的利血平给药剂量、时间。既要考虑到模型动物应出现的典型症状，又要顾及实验所选测的有关指标，如果动物病情过重，测指标（肠电）显示多不好。

2. 小肠电的稳定受多种因素干扰，如温度、机械刺激、酸碱度等；因此，要尽量控制温度，使之接近动物的生理状态；操作时也应减少对肠管的牵拉，每次牵拉后都要有适当的恢复时间。

3. 吸引电极的吸附负压要标准化；吸附力太小，电极易脱落，太大则影响肠电活动。

参考文献

1. 刘学松, 等. 利血平致动物脾虚模型机制的研究. 中国医药学报. 1989, 4（5）: 68.

2. 陈祥贵, 等. 四君子汤对利血平化小鼠体内某些机能变化的影响. 北京医学. 1981, 3（5）: 293.

3. 梁明, 等. 肠平滑肌电活动的细胞外记录方法. 生理学方法与技术（第三集）. 科技出版社. 1987, 180.